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DNA的粗提取与鉴定实验分类比较
[01-02 18:41:13] 来源：http://www.51jxk.com 高三生物 阅读：8609次
概要： 二、方法步骤比较 项目方法步骤添加物质及目的操作要求及目的取用与要求目的要求目的制备鸡血细胞液（教师准备）取0.1g/mL的柠檬酸钠100mL于500mL烧杯中，加鸡血180 mL抗凝缓慢搅拌混匀血液与柠檬酸钠，防血凝离心或置于冰箱使血细胞与血浆分离1．提取鸡血细胞的细胞核物质20mL蒸馏水促进血细胞吸水破裂，释放核物质搅拌：单向、快速、5min加速血细胞破裂过滤：1-2层纱布滤取含DNA的滤液2．溶解细胞核内的DNA2mol/L的 NaCl溶液40mL溶解DNA搅拌：单向、缓慢、1min促进DNA溶解3．析出含DNA的黏稠物加蒸馏水至黏稠物不增加为止降低NaCl溶液浓度，析出DNA搅拌：单向、轻轻混匀溶液，促进析出完整DNA分子4．滤取含DNA的黏稠物 3层～4层纱布过滤获取含DNA的黏稠物5．将DNA的黏稠物再溶解2mol/L的 NaCl溶液20mL再溶解DNA单向搅拌使黏稠物尽可能多地溶解于溶液中6．过滤含有DNA的氯化钠溶液 3层～4层纱布过滤滤取含DNA的滤液7．提取含杂质较少的DNA加入冷却的、体积分数为95%的酒精50mL让部分杂质溶于酒精，析
DNA的粗提取与鉴定实验分类比较,标签：高三生物课本|基础知识|教案,http://www.51jxk.com二、方法步骤比较
| 项目 方法步骤 | 添加物质及目的 | 操作要求及目的 | ||
| 取用与要求 | 目的 | 要求 | 目的 | |
| 制备鸡血细胞液（教师准备） | 取0.1g/mL的柠檬酸钠100mL于500mL烧杯中，加鸡血180 mL | 抗凝 | 缓慢搅拌 | 混匀血液与柠檬酸钠，防血凝 |
| 离心或置于冰箱 | 使血细胞与血浆分离 | |||
| 1．提取鸡血细胞的细胞核物质 | 20mL蒸馏水 | 促进血细胞吸水破裂，释放核物质 | 搅拌：单向、快速、5min | 加速血细胞破裂 |
| 过滤：1-2层纱布 | 滤取含DNA的滤液 | |||
| 2．溶解细胞核内的DNA | 2mol/L的 NaCl溶液40mL | 溶解DNA | 搅拌：单向、缓慢、1min | 促进DNA溶解 |
| 3．析出含DNA的黏稠物 | 加蒸馏水至黏稠物不增加为止 | 降低NaCl溶液浓度，析出DNA | 搅拌：单向、轻轻 | 混匀溶液，促进析出完整DNA分子 |
| 4．滤取含DNA的黏稠物 | 3层～4层纱布过滤 | 获取含DNA的黏稠物 | ||
| 5．将DNA的黏稠物再溶解 | 2mol/L的 NaCl 溶液20mL | 再溶解DNA | 单向搅拌 | 使黏稠物尽可能多地溶解于溶液中 |
| 6．过滤含有DNA的氯化钠溶液 | 3层～4层纱布过滤 | 滤取含DNA的滤液 | ||
| 7．提取含杂质较少的DNA | 加入冷却的、体积分数为95%的酒精50mL | 让部分杂质溶于酒精，析出含杂质较少的DNA | 搅拌：单向 | 促进杂质溶解、DNA析出 |
| 用玻璃棒卷起丝状物，用滤纸吸水 | 获得DNA（白色乳状丝状物） | |||
| 8．DNA的鉴定 | 向2支20 mL试管各加0.015mol/L的NaCl溶液 | 一支对照，一支溶解DNA（作溶媒） | 搅拌 | 促进DNA溶解 |
| 各加4mL二苯胺试剂 | 作为DNA鉴定剂 | 沸水浴5 min，冷却观察颜色 | DNA所在试管溶液变蓝色 | |
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