概要：用氧电极法对过氧化氢酶活性的测定原理过氧化氢酶广泛存在于植物的所有组织中，能将过氧化氢分解为氧和水，可使生物机体免受过氧化氢的毒害作用。测定过氧化氢酶的方法有测压法、滴定法以及分光光度法等。用氧电极法测量放氧速度，方法灵敏而快速。放氧速度与过氧化氢酶活性成正比。仪器药品氧电极仪 记录仪电磁搅拌器 超级恒温水浴注射器、 微量注射器 容量瓶反应杯 亚硫酸钠过氧化氢酶50mmol/L磷酸缓冲液，pH7.0(见附表2)。50mmol/L过氧化氢溶液：取1.4ml30%H2O2用磷酸缓冲液定容至250ml即得。标准过氧化氢酶溶液：称取过氧化氢酶(Sigma)1.0mg(110U/mg)，溶于50mmol/L磷酸缓冲液(pH7.0)11ml中，使酶浓度为10U/ml。操作步骤1.仪器的标定按实验88步骤进行仪器的标定，以求得记录纸上每小格相当的含氧量。2.绘制酶活性标准曲线(1)在反应杯中放满过氧化氢磷酸缓冲液，开启电磁搅拌器搅动10分钟，插入电极，吸去溢出在电极外面的溶液，调节移位旋钮，使记录笔位于满刻度的10─20%左右，使记录纸走动，1─2分钟后温度达到平衡，记录笔画出直

用氧电极法对过氧化氢酶活性的测定

原理

过氧化氢酶广泛存在于植物的所有组织中，能将过氧化氢分解为氧和水，可使生物机体免受过氧化氢的毒害作用。测定过氧化氢酶的方法有测压法、滴定法以及分光光度法等。用氧电极法测量放氧速度，方法灵敏而快速。放氧速度与过氧化氢酶活性成正比。

仪器药品

氧电极仪 　　　　　　记录仪

电磁搅拌器　　　　　 超级恒温水浴

注射器、　　　　　　 微量注射器 　　　　容量瓶

反应杯　　　　　　　 亚硫酸钠

过氧化氢酶

50mmol/L磷酸缓冲液，pH7.0(见附表2)。

50mmol/L过氧化氢溶液：取1.4ml30%H2O2用磷酸缓冲液定容至250ml即得。

标准过氧化氢酶溶液：称取过氧化氢酶(Sigma)1.0mg(110U/mg)，溶于50mmol/L磷酸缓冲液(pH7.0)11ml中，使酶浓度为10U/ml。

操作步骤

1.仪器的标定

按实验88步骤进行仪器的标定，以求得记录纸上每小格相当的含氧量。

2.绘制酶活性标准曲线

(1)在反应杯中放满过氧化氢磷酸缓冲液，开启电磁搅拌器搅动10分钟，插入电极，吸去溢出在电极外面的溶液，调节移位旋钮，使记录笔位于满刻度的10─20%左右，使记录纸走动，1─2分钟后温度达到平衡，记录笔画出直线。

(2)用微量注射器从电极塞小孔中注入10μ110U/ml过氧化氢酶，立即记录最初90秒钟内的氧释放曲线。

(3)根据上述同样步骤，注入不同浓度的过氧化氢酶10μl(例如浓度为20、30、40、50U/ml等)，记录氧释放曲线。

(4)取放氧曲线的直线部分，根据其斜率及走纸速度，计算每分钟氧的释放量。

(5)以过氧化氢酶活性单位为横坐标，每分钟氧的释放量为纵坐标，绘制标准曲线。

3.样品测定

(1)在反应怀内注入50mmol/L过氧化氢磷酸缓冲液搅动10分钟，插上电极，待记录为一直线后，注入10μl合适浓度的待测酶液样品，立即记下最初90秒钟内的放氧曲线。

(2)根据样品的放氧曲线，计算得到每分钟的放氧量，在标准曲线上查得酶活性大小。

(3)如果没有标准的过氧化氢酶，不能计算酶活性单位时，也可以用每分钟的放氧量相对地表示酶的活性大小。

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高三化学备考之必备知识点及常见考点

复习备考的总体思想：注重学科内综合。而所谓的理科综合能力测试，实际上就是某一学科内的综合，学科间综合难度应该不会很大，而且一般学生都能够解决。

一、掌握必要知识点

落实每一个知识点，通过学生的自学，解决知识的覆盖面，尽管高考试题考查的不是所有知识点，但常见的知识点是常考不衰，而且该考的知识点都考到位了。

高考以能力立意进行命题，但是能力的考查，必须结合具体的知识点和技能点进行，因此掌握必要的知识和技能是前提条件。以下是高考常见的考点：

高中化学口诀完全版-另付解释

化学实验基本操作

固体需匙或纸槽，

手贴标签再倾倒。

读数要与切面平，

仰视偏低俯视高。

试纸测液先剪小，

玻棒沾液测最好。

试纸测气先湿润，

粘在棒上向气靠。

酒灯加热用外燃，

三分之二为界限。

硫酸入水搅不停，

慢慢注入防沸溅。

实验先查气密性，

隔网加热杯和瓶。