概要：8.L6C11[2012•天津卷] 黄曲霉毒素B1(AFB1)存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并蓄积，引起癌变。某些微生物能表达AFB1解毒酶，将该酶添加在饲料中可以降解AFB1，消除其毒性。回答下列问题：(1)AFB1属于________类致癌因子。(2)AFB1能结合在DNA的G上，使该位点受损伤变为G′，在DNA复制中，G′会与A配对。现有受损伤部位的序列为—AG′T——TCA—，经两次复制后，该序列突变为________。(3)下图为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图。含AFB1解毒酶基因的菌株――→Ⅰ总RNA―→cDNA――→ⅡPCRAFB1解毒酶基因――→构建酵母工程菌――→表达纯化AFB1解毒酶据图回答问题：①在甲、乙条件下培养含AFB1解毒酶基因的菌株，经测定，甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶;乙菌液细胞密度大、细胞不含解毒酶。过程Ⅰ应选择________菌液的细胞提取总RNA

8.L6C11[2012•天津卷] 黄曲霉毒素B1(AFB1)存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并蓄积，引起癌变。某些微生物能表达AFB1解毒酶，将该酶添加在饲料中可以降解AFB1，消除其毒性。

回答下列问题：

(1)AFB1属于________类致癌因子。

(2)AFB1能结合在DNA的G上，使该位点受损伤变为G′，在DNA复制中，G′会与A配对。现有受损伤部位的序列为—AG′T——TCA—，经两次复制后，该序列突变为________。

(3)下图为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图。

含AFB1解毒酶基因的菌株――→Ⅰ总RNA―→cDNA――→ⅡPCRAFB1解毒酶基因――→构建酵母工程菌――→表达纯化AFB1解毒酶

据图回答问题：

①在甲、乙条件下培养含AFB1解毒酶基因的菌株，经测定，甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶;乙菌液细胞密度大、细胞不含解毒酶。过程Ⅰ应选择________菌液的细胞提取总RNA，理由是________________________________________________________________________。

②过程Ⅱ中，与引物结合的模板是________________________________________________________________________。

③检测酵母工程菌是否合成了AFB1解毒酶，应采用________方法。

(4)选取不含AFB1的饲料和某种实验动物为材料，探究该AFB1解毒酶在饲料中的解毒效果。实验设计及测定结果见下表。

组

别

添加

AFB1(μg/kg饲料) AFB1解毒酶(g/kg饲料) 肝脏AFB1残

留量(ng/g)

A 0 0 6.4

B 100 0 20.9

C 100 1 16.8

D 100 3 11.7

E 100 5 7.3

F 100 7 7.3

据表回答问题：

①本实验的两个自变量分别为________________________________________________________________________。

②本实验中，反映AFB1解毒酶解毒效果的对照组是______________。

③经测定，某污染饲料中AFB1含量为100 μg/kg，则每千克饲料应添加______________克AFB1解毒酶，解毒效果最好，同时节约了成本。

(5)采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是：从提高酶的活性出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的______________序列。

8.(1)化学

(2)—ATT——TAA—

(3)①甲　甲菌液细胞的AFB1解毒酶基因已转录生成mRNA，而在乙菌液细胞中该基因未转录

②AFB1解毒酶基因的cDNA

③抗原—抗体杂交

(4)①AFB1的添加量和AFB1解毒酶的添加量

②B组(或B组+A组)

③5

(5)脱氧核苷酸

[解析] 本题考查基因工程与蛋白质工程的相关内容，考查学生的识图能力和综合分析能力。

(1)黄曲霉毒素B1(AFB1)是一种化学物质，属于化学类致癌因子。

(2)根据题中信息可知G′会与A配对，所以受损伤部位的序列经一次复制后，变为—TAA——AG′T—和—AGT——TCA—序列，再经一次复制后变为—ATT——TAA—、—TAA——AG′T—、—TCA——AGT—和—AGT——TCA—序列，该序列经两次复制后突变为—ATT——TAA—。

(3)①过程Ⅰ应选择甲菌液的细胞提取总RNA ，理由是甲菌液细胞中含AFB1解毒酶，意味着完成了基因的表达，转录出了mRNA ，而乙菌液细胞中不含AFB1解毒酶，未发生转录，所以应选择甲菌液的细胞提取总RNA;②过程Ⅱ中，根据图示可以看出与引物结合的模板是cDNA;③检测基因是否表达应采用抗原-抗体杂交方法。

(4)①由表中信息可知AFB1的有无和AFB1解毒酶的含量是本实验的两个自变量。②本实验中，A组是无添加AFB1、无添加AFB1解毒酶的对照组，B组是无添加AFB1解毒酶的对照组。C～F组与B组(或B组+A组)对照能反应AFB1解毒酶的解毒效果。③从表中信息可以得出，某污染饲料中AFB1含量为100 μg/kg 时，每千克饲料应添加5克AFB1解毒酶，解毒效果最好，同时节约成本。

(5)蛋白质工程的基本途径是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)。

40.L6[2012•课标全国卷] [生物—选修3现代生物科技专题]

根据基因工程的有关知识，回答下列问题：

(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有________和________。

(2)质粒运载体用EcoR Ⅰ切割后产生的片段如下：

AATTC……G

G……CTTAA

为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoR Ⅰ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是________________________________________________________________________。

(3)按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即________DNA连接酶和________DNA连接酶。

(4)反转录作用的模板是________，产物是________。若要在体外获得大量反转录产物，常采用________技术。

(5)基因工程中除质粒外，________和________也可作为运载体。

(6)若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是______________________________________________。

40.(1)黏性末端　平末端

(2)切割产生的DNA片段末端与EcoR Ⅰ切割产生的相同

(3)大肠杆菌　 T4

(4)mRNA(或RNA)　cDNA(或DNA)　 PCR

(5)噬菌体　动植物病毒

(6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱

[解析] 本题考查基因工程技术，考查学生的理解能力。(1)当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时，产生的是黏性末端，而当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时，产生的则是平末端。(2)为使运载体与目的基因相连，不同的限制酶应切割出相同的黏性末端，它们必须要能识别相同的核苷酸序列。(3)根据酶的来源不同，DNA连接酶可以分为两类：一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为大肠杆菌E•coli DNA连接酶;另一类是从T4噬菌体中分离出来的，称为T4 DNA连接酶。(4)反转录是以mRNA(或RNA)为模板合成cDNA(或DNA)的过程。可以在体外短时间内大量扩增DNA的技术叫PCR(多聚酶链式反应)技术。(5)基因工程中除质粒外，还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等可作为运载体。(6)大肠杆菌细胞外有细胞壁，能阻止其他物质的进入，只能通过Ca2+处理细胞，使细胞处于能吸收周围环境中DNA分子的感受态才能使重组质粒进入细胞，未处理的大肠杆菌吸收重组质粒的能力极弱。

32.L6[2012•江苏卷] 图11表示含有目的基因D 的DNA 片段长度(bp 即碱基对)和部分碱基序列，图12表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4 种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题：

图11　　　　　　　　　　　图12

(1)图11的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由__________________连接。

(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图11中DNA片段，产生的末端是________末端，其产物长度为________。

(3)若图11中虚线方框内的碱基对被T-A 碱基对替换，那么基因D 就突变为基因d。从杂合子中分离出图11及其对应的DNA 片段，用限制酶Sma Ⅰ完全切割，产物中共有________种不同长度的DNA 片段。

(4)若将图12中质粒和目的基因D 通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是________。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌， 一般需要用添加________的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

32.(1)脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖

(2)平　537 bp、790 bp、661 bp

(3)4

(4)BamHⅠ　抗生素B　同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D与质粒反向连接

[解析] 本题考查基因工程，考查学生分析及理解能力。(1)据DNA分子的结构可知，在一条链中相邻两个碱基之间的连接为：碱基-脱氧核糖-磷酸-脱氧核糖-碱基。(2)图11 DNA分子中，限制酶SmaⅠ的切割位点有2个，可将该DNA切割为3个片段，据图中切割位置可数出，3个片段的长度依次为537 bp、790 bp、661 bp。(3)基因D突变为基因d后，只有1个限制酶SmaⅠ的切割位点，基因d被切割为1 327 bp和661 bp 2种片段;杂合子中还有基因D，可被切割为3种片段，因此产物中共4种片段。(4)目的基因的插入位点应在一个标记基因内，若选用限制酶MboⅠ，则两个标记基因都会被切开，因此只能选择限制酶BamHⅠ，因此应加入抗生素B进行筛选。含目的基因的DNA片段和运载体用同种限制酶切割，可能会发生反向连接，使部分菌株中基因D不能表达。

上一页  [1] [2] [3] [4] [5] [6]  下一页