概要：2.L7 [2012•广东卷] 培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是()A.组织培养B.细胞杂交C.显微注射 D.核移植2.A[解析] 草莓是无性繁殖的作物，它感染的病毒很容易传播给后代，病毒在作物体内逐年积累，就会导致作物产量降低，品质变差。而植株分生区附近(如茎尖)的细胞含病毒极少，甚至无病毒，因此可以利用植物组织培养技术培养出脱毒幼苗。植物体细胞杂交就是将不同的植物体细胞在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。动物细胞融合也称细胞杂交。显微注射是将含有目的基因的表达载体导入动物细胞的方法。核移植是培养克隆动物的方法。故选A。L8 动物细胞工程与单克隆抗体32.L6、L8[2012•福建卷] [生物—现代生物科技专题]肺细胞中的let­7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let­7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。图1图2请回答：(1)进行过程①时，需用____________酶切开载体以插入let­

2.L7 [2012•广东卷] 培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是(　　)

A.组织培养　　　　　　　B.细胞杂交

C.显微注射 D.核移植

2.A　[解析] 草莓是无性繁殖的作物，它感染的病毒很容易传播给后代，病毒在作物体内逐年积累，就会导致作物产量降低，品质变差。而植株分生区附近(如茎尖)的细胞含病毒极少，甚至无病毒，因此可以利用植物组织培养技术培养出脱毒幼苗。植物体细胞杂交就是将不同的植物体细胞在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。动物细胞融合也称细胞杂交。显微注射是将含有目的基因的表达载体导入动物细胞的方法。核移植是培养克隆动物的方法。故选A。

L8 动物细胞工程与单克隆抗体

32.L6、L8[2012•福建卷] [生物—现代生物科技专题]

肺细胞中的let­7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let­7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。

图1

图2

请回答：

(1)进行过程①时，需用____________酶切开载体以插入let­7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let­7基因转录，该部位称为________。

(2)进行过程②时，需用______酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。

(3)研究发现，let­7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取______进行分子杂交，以直接检测let­7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中______(RAS mRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。

32.(1)限制性核酸内切(或限制)　启动子

(2)胰蛋白　(3)RNA　RAS蛋白

[解析] 本题主要考查有关基因工程和细胞工程中的知识。(1)过程①表示基因表达载体的构建，在该过程中需要用限制酶对载体进行切割以便于目的基因的插入;启动子是一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶结合和识别的位点，RNA聚合酶结合到该位点，可驱动转录过程。(2)过程②表示动物细胞培养，培养过程中出现接触性抑制后可以用胰蛋白酶处理，使之分散成单个的细胞，之后分装到其他培养瓶里面进行传代培养。(3)判断目的基因是否在受体细胞中转录，可用分子杂交技术来进行检测，从细胞中提取mRNA和用放射性同位素或者荧光标记的目的基因单链DNA片段进行杂交。根据题中信息“肺组织细胞中的let­7基因表达减弱，癌基因RAS表达就增强，引发肺癌”，导入let­7基因后，肺癌细胞受到抑制，说明RAS基因表达减弱，导致细胞中的RAS蛋白含量减少，进而导致癌细胞受抑制。

L9 胚胎工程

2.L9[2012•浙江卷] 下列关于高等哺乳动物受精与胚胎发育的叙述，正确的是(　　)

A.绝大多数精卵细胞的识别具有物种特异性

B.卵裂球细胞的体积随分裂次数增加而不断增大

C.囊胚的滋养层细胞具有发育全能性

D.原肠胚发育分化形成内外两个胚层

2.A　[解析] 本题考查胚胎工程的内容，考查学生对该内容的识记并理解应用能力。同种动物精卵细胞表面有相互识别的特异性蛋白，所以能进行特异性识别。卵裂球尚未着床，不能从母体获得营养物质，所以细胞的体积会随分裂次数增加而不断减小。囊胚外表有一层扁平细胞，称为滋养层，将发育成胎盘等附属结构，囊胚内部的内细胞团细胞具有发育全能性。原肠胚发育分化形成内中外三个胚层。

1.D2L9[2012•天津卷] 下列有关干细胞的叙述，错误的是(　　)

A.自体干细胞移植通常不会引起免疫排斥反应

B.胚胎干细胞在体外培养能增殖但不能被诱导分化

C.组织的细胞更新包括细胞凋亡和干细胞增殖分化等过程

D.造血干细胞具有分化出多种血细胞的能力，可用于治疗白血病

1.B　[解析] 本题考查干细胞的相关内容，考查学生的识记、理解能力。干细胞是指动物和人体内仍保留着少数具有分裂和分化能力的细胞，它们能够通过增殖和分化产生各种功能的细胞，补充到相应细胞凋亡的动物体中， C正确;干细胞也可用于自体移植，不会发生免疫排斥反应，A正确;造血干细胞可分化为红细胞、白细胞和血小板，可用于治疗白血病，D正确;胚胎干细胞在体外培养能增殖，并能被诱导分化形成新的组织细胞，B项错误。

9.L9[2012•江苏卷] 通过胚胎移植技术，可以实现良种牛的快速繁殖。下列相关叙述正确的是(　　)

A.对供体和受体母牛都要进行相同激素处理

B.受精和胚胎的早期培养都需要在体外进行

C.对冲卵获得的原肠胚检查合格后方可移植

D.胚胎分割移植实现同卵多胎的成功率较低

9.D　[解析] 胚胎移植中对供、受体母牛的同期发情处理是用同种激素，但还需单独对供体母牛注射促性腺激素，达到超数排卵的目的。胚胎移植中用的胚胎可能是在体外受精获得的，也可能是在体内受精获得的。从供体母牛体内冲出的胚胎如果处在可以移植的时期，则不必在体外另行培养了。冲卵获得的胚胎应该在桑椹胚或囊胚阶段。就现有水平来讲，二分胚胎成活的几率较大，多分胚胎成功的可能性较小，可能与所分割胚胎中细胞质的不断减少有关。

L10 生物技术的安全性和伦理问题

13.L10[2012•江苏卷] 下列关于转基因生物安全性的叙述，错误的是(　　)

A.种植转基因作物应与传统农业种植区隔离

B.转基因作物被动物食用后，目的基因会转入动物体细胞中

C.种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的遗传多样性

D.转基因植物的目的基因可能转入根际微生物

13.B　[解析] 本题考查生物技术的安全性和伦理问题。种植转基因作物时，为了防止发生基因污染应与传统作物隔离种植。转基因作物被动物食用后，目的基因在动物的消化道中被分解成小分子的有机物，所以进入动物细胞的不是目的基因而是目的基因的消化产物，故B错。C项中转基因植物中目的基因可能随花粉传播到同种的野生植物中，从而影响到野生植物基因的多样性。转基因植物的目的基因可能因为微生物的侵染进入微生物中。

6.L10[2012•江苏卷] 下列关于人类基因组计划的叙述，合理的是(　　)

A.该计划的实施将有助于人类对自身疾病的诊治和预防

B.该计划是人类从细胞水平研究自身遗传物质的系统工程

C.该计划的目的是测定人类一个染色体组中全部DNA 序列

D.该计划的实施不可能产生种族歧视、侵犯个人隐私等负面影响

6.A　[解析] 人类基因组计划的研究将发现一些特殊的“患病基因”，能帮助人类对自身所患疾病的诊治，还能帮助人们预防可能发生的与基因有关的疾病。人类基因组计划是在基因水平上研究而不是在细胞水平。该计划要测定的不仅是一个染色体组的基因序列，应该包含22条常染色体和X、Y两条性染色体，共24条染色体上的DNA序列。人类基因组计划可能带来种族歧视和侵犯个人隐私等负面影响，由该计划延伸来的基因身份证就是明显的例子。

L11 生态工程

L12 生物工程及技术综合

35.L12[2012•山东卷] [生物—现代生物科技专题]

毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIF Ⅱ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIF Ⅱ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图所示。

(1)过程①中最常用的运载工具是__________，所需要的酶是限制酶和____________。

(2)在过程②中，用________处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5%CO2的气体环境中，CO2的作用是________________________________________________________________________。

(3)在过程③中，用________处理以获取更多的卵(母)细胞。成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行________处理。

(4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是__________。在胚胎移植前，通过________技术可获得较多胚胎。

35. (1)质粒　 DNA连接酶

(2)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)　维持培养基(液)pH

(3)促性腺激素(或促滤泡素、孕马血清)　去核

(4)(早期)胚胎培养　胚胎分割

[解析] 本题主要考查基因工程及胚胎工程的有关知识，意在考查学生对知识的识记、理解能力。(1)图中过程①为重组载体的构建过程，最常用的运载工具为质粒，所需要的工具酶有限制性内切酶和DNA连接酶。(2)过程②为动物细胞培养过程，首先用胰蛋白酶处理将皮肤组织块分散成单个细胞，培养液中需通入一定的CO2，主要作用是维持培养液的pH值。(3)过程③常采用注射促性腺激素的方法，以便从母羊中获得更多的卵母细胞，成熟的卵母细胞在核移植前需要进行去核处理。(4)重组细胞到早期胚胎过程所运用的胚胎工程技术是动物细胞培养技术或早期胚胎培养技术，为获得更多的胚胎常采用胚胎分割移植技术。

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